Floresan rezonans energiýa geçirijisi (FRET)
Floresan rezonans energiýa geçirijisi (FRET), radiator däl energiýa geçiriş prosesi bolup, onda donoryň tolgundyrylan döwlet energiýasy, birek-birekli elektrik jübütleriniň täsiri arkaly kabul edijiniň tolgundyrylan ýagdaýyna geçirilýär.Bu amal fotonlary öz içine almaýar we şonuň üçin radiasiýa däl.Bu pikiriň çalt, duýgur we ýönekeý bolmagyň artykmaçlyklary bar.
FRET analizinde ulanylýan boýag birmeňzeş bolup biler.Emma amaly programmalaryň köpüsinde dürli boýaglar ulanylýar.Gysgaça aýdanyňda, ýagty rezonans energiýasynyň geçirilmegi, donor topary tolgundyrylanda donordan (boýag 1) kabul edijä (boýag 2) bir jübüt dipolyň berilmegi.Umuman aýdanyňda, Donor florofor toparynyň zyňyndy spektri, kabul ediji toparyň siňdiriş spektri bilen gabat gelýär."Iki floroforyň arasyndaky aralyk ýerlikli bolanda (10 - 100 A), florofor energiýasynyň donordan kabul edijä geçirilmegi syn edilip bilner."Energiýa geçiriş usuly reseptoryň himiki gurluşyna baglydyr:
1. Molekulýar titremä öwrülýär, ýagny energiýa geçirişiniň ýagty çyrasy ýitýär.(Reseptor ýeňil söndüriji)
2. Zyňyndy reseptoryň özünden has güýçlidir, netijede ikinji derejeli floresan spektriniň üýtgemegine sebäp bolýar. "(Reseptorlar ýagty çykaryjylardyr).
Donor topary (EDANS) we kabul ediji gen (DABCYL) AIW proteiniň tebigy substraty bilen birmeňzeş baglanyşýarlar we substrat aýrylmasa, DABCYL EDANS-y öçürip biler, soň bolsa ftor bilen tanalmaz.AIW-1 proteaz kesilenden soň, EDANS indi DABCYL tarapyndan söndürilmeýär we soň EDANS lusiferazalary tapylyp bilner.Proteaz ingibitorlarynyň elýeterliligini EDANS-yň floresan intensiwliginiň üýtgemegi bilen gözegçilik edip bolýar.
FRET peptidleri peptidazyň näbelliligini öwrenmek üçin amatly guraldyr.Onuň reaksiýa prosesine yzygiderli gözegçilik edip bolýandygy sebäpli, ferment işjeňligini kesgitlemek üçin amatly usul üpjün edýär.Donor / kabul ediji tarapyndan peptid baglanyşyklarynyň gidrolizinden soň öndürilen gabyk, nanomolar konsentrasiýalarynda ferment işjeňligini üpjün edýär.FRET peptidi üýtgemese, içki çyranyň duýdansyz ýitip gitmegini görkezýär, ýöne donor / kabul edijiniň garşysyndaky islendik peptid baglanyşygy döwülende, yzygiderli kesgitlenip bilinýän we ferment işjeňliginiň mukdary kesgitlenip bilýän fleş çykýar.
Iş wagty: Awgust-14-2023