HPLC ýokary takyklyk guraly hökmünde ulanylanda dogry işlemese, käbir kynçylykly ownuk problemalara aňsatlyk bilen sebäp bolup biler.Iň ýaýran meseleleriň biri sütüniň gysylmagy meselesidir.Nädogry hromatografy nädip çalt çözmeli.HPLC ulgamy esasan suw howdany çüýşesinden, nasosdan, injektordan, sütünden, sütün temperatura kamerasyndan, detektordan we maglumatlary gaýtadan işlemek ulgamyndan durýar.Tutuş ulgam üçin sütünler, nasoslar we detektorlar esasy komponentler we problemalara ýykgyn edýän esasy ýerlerdir.
Sütün basyşynyň açary, HPLC ulanylanda ýakyndan üns berilmeli ýerdir.Sütün basyşynyň durnuklylygy hromatografiki pik görnüşi, sütüniň netijeliligi, aýralyk netijeliligi we saklanyş wagty bilen berk baglanyşyklydyr.Sütün basyşynyň durnuklylygy, basyş bahasynyň durnukly bahada durnuklydygyny aňlatmaýar, tersine, basyşyň üýtgeme diapazonynyň 345kPa ýa-da 50PSI aralygyndadygyny aňladýar (sütün basyşy durnukly we ýuwaş-ýuwaşdan üýtgän mahaly gradient elýusiýasyny ulanmaga mümkinçilik berýär).Gaty ýokary ýa-da gaty pes basyş sütün basyşy meselesidir.
HPLC şowsuzlyklaryna we çözgütlerine has ýykgyn edýär
1, ýokary basyş HPLC-ni ulanmakda iň köp ýaýran mesele.Bu basyşyň duýdansyz ýokarlanmagyny aňladýar.Umuman, aşakdaky sebäpler bar: (1) Umuman, bu akym kanalynyň petiklenmegi bilen baglanyşykly.Bu pursatda biz ony aýratyn gözden geçirmeli.a.Ilki bilen vakuum nasosynyň girişini kesiň.Bu pursatda, PEEK turbasy suwuklyk bilen dolduryldy, şonuň üçin PEEK turbasy suwuklygyň islegine görä damýandygyny ýa-da ýokdugyny görmek üçin çözüji çüýşeden has kiçi boldy.Suwuklyk haýal dammasa ýa-da haýal dammasa, çözüji süzgüç kellesi petiklenýär.Bejergi: 30% azot kislotasyna ýarym sagat çümdüriň we ultrapura suwy bilen ýuwuň.Suwuklyk tötänleýin damsa, çözüji süzgüç kellesi kadaly we barlanýar;b.Jübi fazasy sütünden geçmez ýaly arassalamak klapanyny açyň we basyş ep-esli azalmasa, süzgüç ak kellesi petiklenýär.Bejergi: Süzülen ak kelleler aýryldy we 10% izopropanol bilen ýarym sagatlap sonikasiýa edildi.Basyşyň 100PSI-den aşak düşýändigini göz öňünde tutsak, süzülen ak kelle adaty we barlanýar;c.Sütüniň çykyş ujuny aýyryň, eger basyş peselmese, sütün petiklenýär.Bejergi: Bufer duzy böwetlenýän bolsa, basyş kadaly bolýança 95% ýuwuň.Päsgelçilik has ýokary derejede saklanan material sebäpli ýüze çykan bolsa, adaty basyşa tarap ylgamak üçin häzirki ykjam fazadan has güýçli akym ulanylmaly.Uzak möhletli arassalaýyş basyşy ýokardaky usul boýunça peselmese, sütüniň giriş we çykyşy tersine gurala birikdirilen hasap edilip, sütün ykjam faza bilen arassalanyp bilner.Bu wagt sütün basyşy henizem peselmese, sütüniň girelgesi elek plastinkasyny diňe çalşyp bolar, ýöne amal gowy bolmasa, sütün effektiniň peselmegine sebäp bolar, şonuň üçin az ulanmaga synanyşyň.Kyn meseleler üçin sütüniň çalyşmagy göz öňünde tutulyp bilner.
(2) Nädogry akym tizligi: Dogry akym tizligi täzeden düzülip bilner.
(3) Nädogry akym gatnaşygy: akymlaryň dürli nisbatlarynyň ýapyşyklyk görkezijisi başga, ýokary ýapyşykly akymyň degişli ulgam basyşy hem has uludyr.Mümkin bolsa, aşaky ýapyşykly erginleri çalşyp ýa-da täzeden gurup we taýýarlap bolýar.
(4) Ulgam basyşy nol drift: suwuklyk derejesindäki datçigiň noluny sazlaň.
2, basyş gaty pes (1) adatça ulgamyň syzmagy sebäpli ýüze çykýar.Näme etmeli: Her baglanyşygy, esasanam sütüniň iki ujundaky interfeýsi tapyň we syzýan ýeri berkidiň.Postazgyny aýyryň we PTFE filmini degişli güýç bilen berkidiň ýa-da çyzyň.
(2) Gaz nasosyň içine girýär, ýöne basyş adatça ýokary we pes döwürde durnuksyz bolýar.Has çynlakaý nasos suwuklygy siňdirip bilmez.Bejergi usuly: arassalaýjy klapany açyň we akym tizliginde 3 ~ 5ml / min arassalaň.Notok bolsa, howa köpürjikleri ýörite iňňe turbasyny ulanyp, gaz çykaryjy klapanda islenýärdi.
.
(4) Salgy klapany ýapylmaýar: tizlenmeden soň salgylanma klapan ýapylýar.Adatça 0,1-e düşýär.Reference 0,2mL / min.
Gysgaça mazmun:
Bu kagyzda diňe suwuk hromatografiýadaky umumy meseleler seljerilýär.Elbetde, amaly amalymyzda başga-da köp problema bilen ýüzbe-ýüz bolarys.Näsazlyklary çözmekde aşakdaky ýörelgelere eýermelidiris: gipotetiki faktor bilen meseläniň arasyndaky baglanyşygy kesgitlemek üçin diňe bir faktory üýtgetmeli;Adatça, näsazlyklary düzetmek üçin bölekleri çalyşanymyzda, sökülmedik bölekleri galyndylaryň öňüni almak üçin yzyna goýmaga üns bermelidiris;Gowy ýazgy endigini emele getirmek, näsazlyklary çözmegiň üstünliginiň açarydyr.Sözümiň ahyrynda, HPLC ulanylanda, deslapky deslapky görnüşe we enjamyň dogry işlemegine we hyzmat edilmegine üns bermek möhümdir.
Iş wagty: 18-2023-nji sentýabr