Peptidlerde ýerleşýän Tyrr, Ser, Thr fosforilleşdirýän durmuş proseslerinde möhüm rol oýnaýar.Fosforirlenen aminokislotalar, häzirki wagtda bir fenil fosforirlenen aminokislotalarda ulanylýan fosfor kislotasy peptidini öndürmekde köplenç ulanylýar.HBTU / fosforirlenen aminokislotalar köplenç fosforirlenen aminokislotalary HOBt / DIEA usuly bilen birikdirmek üçin ulanylýar, ýöne fosfor kislotasy peptidi bu çemeleşmäniň kemçiliklerini saýlaýar, esasanam döredilen has uzyn peptid peptidlerinde ýa-da aminokislota fosfatda, netijeliligi pes, pes soňky önümiň arassalygy.Bu fosfopeptid üçin fosforilasiýadan soňky saýlama çemeleşmäni göz öňünde tutduk.Nesil prosesi, peptid sintezinden soň bellik edilmeli aminokislotanyň gapdal zynjyrly gorag toparlaryny saýlap aýyrmakdyr.Tyr üçin Thr goralmadyk gapdal zynjyrlar bilen aminokislotalary ulanyp göni reaksiýa berip biler.-Ser (trt), mukdar taýdan 1% TFA / DCM gurşawynda aýryldy.
Fosforilýasiýa, goşa benzol fosfit fosforamid we dört azot bilen öndürilýär we gidroksiýa birikdirilen fosforid tetrazolium işjeň araçylary emele gelýär, soňra kislota peroksid okislenmesi fosforil emele gelýär, doly reaksiýa.
Häzirki wagtda peptid fosforirlenen modifikasiýa usuly iki esasy görnüşdir:
(1) ortaça kepillendirilen fosforirlenen aminokislotalary polipeptid yzygiderliligine gönüden-göni girizmek;
(2) peptid yzygiderliliginde emele gelen rezinden soň, Ser, Tyr ýa-da gapdal zynjyr gidroksiliniň Th fosforilýasiýasyna.
1) fosforirlenen aminokislotalar peptid yzygiderliligini gönüden-göni girizer:
.Agny, fosforilleşdirilmeli aminokislotalar (Thr, Ser ýa-da Tyr) ulanyp öňünden fosforirlener we degişli derejede goralar, soňra adaty SPPS öndürmek prosesi esasynda fosforilasiýa polipeptid indeksiniň saýlama nokadyna çenli çäklendiriler. .Bu usul işlemek aňsat, peptid kärhanalarynyň fosforirlenen üýtgemeginiň esasy usuly boldy.
2) peptid yzygiderliliginde emele gelen rezinden soň, Ser gidroksi fosforilýasiýa, Tyr ýa-da Thr gapdal zynjyrlaryna:
Polipeptid usulyna bir gysylmanyň fosforilýasiýasyny ulanyp, fosforilasiýa bezegi, gapdal zynjyryň bezeginde uly toparlaryň döredýän steriki päsgelçiligi sebäpli, aminokislotalaryň fosforilýasiýasynyň peptid zynjyry bilen gysylmagy kyn.Geljekde aminokislotalary ornaşdyrmak has kyn bolar, esasanam birnäçe fosforilýasiýa ýerlerini öz içine alýan bezegde nesil gaty kynlaşar, önümiň soňky düzümi çylşyrymly, aýyrmak kyn we hasyllylygy gaty pes bolar.
Şonuň üçin, peptid zynjyryndaky birnäçe ýer fosforirlenen mahaly, rezinde peptid yzygiderliligini döredip, soňra Ser, Tyr ýa-da Thr-iň gapdal zynjyrly gidroksil topary tarapyndan fosforilleşdirip bolýar: onuň emele gelmegi esasan saýlama aýyrmagy öz içine alýar. peptid sintezinden soň aminokislotalaryň ykrar edilmegini talap edýän gapdal zynjyr gorag topary.Tyr üçin Thr aminokislotanyň gapdal zynjyrlaryny gönüden-göni ulanyp biler, jogap hökmünde goralmaýar.
Gapdal zynjyry goramak bazasy 1% TFA / DCM gurşawy mukdar taýdan aýrylyp bilner.Bu usul saýlanylanda, gidroksil topary bilen baglanyşdyrylan, dibenzil fosforamidit we tetrazolium ulanyp, fosforidit tetrazolium işjeň aralyk döredilip, reaksiýany tamamlamak üçin peroksiýasid gurşawynda fosforil topary döretmek üçin oksidlenýär.
Iş wagty: 08-2023-nji sentýabr